尿素はELISA法による8-OHdG分析において陽性反応を示す

李云善、宋明芬、大津山祐子、河井一明、葛西宏（産業医大）；松本由紀、吉田吏江、小川康恭（労働安全衛生総合研）

尿中8-OHdGは生体内酸化ストレスマーカーとして広く分析されている。分析法としてELISA法とHPLC法が使われているが両者による分析結果が一致しない点が以前から議論されてきた (1,2)。この原因を解明するためにヒト尿を逆相HPLCにより分画し、各分画をELISA法によりアッセイした。その結果8-OHdG分画以外に早く溶出される分画が陽性反応を示した。その分画に溶出される尿成分をELISA法で検討したところ尿素が原因物質であった。尿素はマウス、ラット、ヒトの尿、血清等に高濃度に存在し様々な要因で変動することからELISA法による8-OHdGの正確な測定のためには改善が必要と思われる。

参考論文

1)      Cooke MS, et al., Free Radic Biol Med., 41, 1829-1836 (2006)

2)      Cooke MS, et al., Cancer Epidemiol Biomarkers Prev., 17, 3-14 (2008)

Urea generates a positive reaction in the 8-OHdG analysis by ELISA method

Urinary 8-OHdG is analyzed widely as a marker of oxidative stress. For its analysis, ELISA- and HPLC-methods are generally used, although discrepancies in the analysis data between these methods have often been discussed (1,2). To clarify this problem, we fractionated human urine by reverse-phase HPLC, and each fraction was assayed by the ELISA method. In addition to the 8-OHdG fraction, a positive reaction was observed in the early eluted fraction. The components in this fraction were examined by the ELISA method. Urea was found to be the responsible component in this fraction. Urea is present in high concentrations in the urine and serum of mice, rats and humans, and its level is influenced by many factors. Therefore, improvements are required for the accurate analysis of urinary 8-OHdG by the ELISA method.